經典的簡易凝膠滲透色譜柱大多采用玻璃管作為柱管材料,一般玻璃柱管耐壓是3000~4000kPa,不能承受更高的壓力,無法滿足凝膠滲透色譜柱的需要。
而不銹鋼柱管的耐壓可達幾萬kPa,甚至更高,所以玻璃柱管逐漸被不銹鋼柱管取代。目前,GPC所用的柱子大部分采用不銹鋼柱管,根據不同的色譜分離條件,來選擇合適填料規格的色譜柱。
那么凝膠滲透色譜柱該如何進行選擇呢?下面一起來看看吧
目前隨著GPC技術的不斷發展和更新換代,在一般的凝膠滲透色譜儀中,凝膠滲透色譜柱的長度多在150~600mm之間,柱內徑約為2.1~30mm。過分長和粗的色譜柱在裝柱過程中,對裝柱技術的要求更高,想要裝出既均勻又緊密而達到高效的色譜柱,難度較高。
實驗室經常選用2~5根甚至更多根色譜柱串聯起來使用,也可將同一型號的2根或2根以上的色譜柱串聯使用,這樣可以增加柱容量,擴展色譜柱的線性分離范圍,得到高的分離效率。
比如技術人員為了要增加對低分子量部分的分離效率,可以通過增加裝有小孔徑凝膠的色譜柱數量來達到分離低分子量物質的目的。
實驗要求凝膠滲透色譜柱的柱管內表面必須光滑平直,這樣流動相在色譜柱內就不會形成溝流或死域,也就是說在該區域內,流動相可能停滯不前或因溝流使流速比柱中其他部分快,這些都會影響色譜柱的分離效率。
凝膠滲透色譜柱內徑的大小也是影響分離效率的一個因素,初期的GPC經常使用2~5cm內徑的粗柱,由于GPC技術發展不夠成熟,導致分離效率低。
現在高效GPC通常使用2.1~8mm內徑的不銹鋼色譜柱。在制備型GPC儀中,所用的柱內徑較大,一般在10~30mm之間。